苏州点晶郜安国先生在2019四川省宠物协会医师分会年会上作快速PCR的临床价值专题汇报，推动点晶生物Click i 核酸荧光检测仪在四川正式上市。

点晶生物，基于自主研发的常温核酸扩增——EMA-荧光探针法，配套Click i核酸荧光检测仪和快速核酸释放试剂，可在30分钟内检测样本中病原体的特异性基因片段，为宠物的疾病诊断提供辅助手段。

检测流程

核心技术——EMA（Enzymes Mediated Amplification，常温核酸扩增）

基于分子仿生学的原理，把生物体内（如大肠杆菌，酵母或人体等）多酶介导的核酸复制机理在体外再现，使痕量的核酸靶标在普通生物耐受的条件下（常温下）进行快速的扩增，同时利用特异性荧光探针结合扩增产物，通过荧光检测仪实时监测荧光信号，实现核酸靶标的快速扩增和检测。

PCR的历史

聚合酶链式反应（英文：Polymerase chain reaction，缩写：PCR，又称多聚酶链式反应）是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段，这种方法可在生物体外进行，不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。聚合酶链式反应技术被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于传染病的诊断。

作为现代生物技术的基础的PCR技术，出现在1983年。PCR过程中的解链、退火、以及延伸的循环操作已经成为核酸扩增步骤的标准过程，同时PCR也成为了核酸扩增的同义词。然而，这一技术是利用耐热性核酸聚合酶在人为设定温度循环下实现的，在自然界生物体内核酸并不是这样延伸或者扩增的。人们所熟悉的生物大都是在条件非常温和的条件下（而且是在恒温下）实现其核酸延伸或扩增的。点晶生物的核心技术就是实现在体外的试管中（in vitro），实现在生物体内（in vivo）的高效的核酸扩增过程。

在PCR技术问世后的30多年中，衍生出许多灵敏度更高，或者操作更简便，或者定量的方法。这些方法以及广泛应用于科研，医院，疾控，以及农林牧渔等等。然而在大规模简化操作过程，或者提供定量化的研发及其商业化过程中，使用者对仪器，试剂，耗材，甚至技术支持的依赖却与日俱增，反而限制了该技术在更广泛领域的应用。

在核酸扩增技术发展过程中，很多人努力改进在温度来简化核酸扩增步骤。经典的PCR是三温度循环（解链，退火，和延伸），在其它改进型的PCR技术都是两温度循环（退火和延伸合并为一步）。在恒温扩增（isothermal amplification）方面，出现了如等温核酸扩增，RNA扩增等技术，以Bst核酸聚合酶延伸的恒温扩增的技术路线大多是利用两对或者更多的引物，在60度左右实现单一温度的扩增。该技术在起始的引物退火时，需要一个90度以上的步骤来实现引物和模板的配对。以RNA逆转录酶来检测核酸的技术，最佳反应温度在42度左右，该技术用以检测RNA，不需要解开双链来配对，不存在解链的问题，也避免了产物检测后续的污染问题。　

EMA的优势

更快：PCR及其衍生的温度循环有相当多的时间都用于非扩增（解链，退火）的阶段，而常温核酸扩增一直持续不断的进行。其次，相比于Taq聚合酶1000bp/min的速度，常温核酸扩增的效率大于3000bp/min；

更灵敏：在生物体内，核酸酶的含量非常稀少（例如大肠杆菌内聚合酶10个拷贝甚至更少），目的基因更少（单拷贝），但是各个酶彼此相互协同作用，能在浓度极低的情况下完成核酸扩增。常温核酸扩增模拟了体内的核酸扩增原理，从而达到很高的扩增灵敏度。另外，由于常温核酸扩增的引物特异性非常高，在目前检测的目的核酸片段扩增中，还没有发现非特异性扩增，降低了非特异性的背景，提高了灵敏度。

更简单：相比于温度循环的控制（PCR程序设置），要考虑相应耗材的选择（传热性，密封性好的试管），Tm值匹配，或者某些恒温扩增复杂的引物设计规则，常温核酸扩增整个操作都只需要25-42ºC，只需一对引物，产物检测可以通过核酸电泳，或则荧光检测，或者试纸条检测。

产品整体设计亮点：

1、常温操作，所有的设计都在常温下实现所有的操作，甚至包括产品的运输和保存（常温核酸扩增试剂的干粉化在研发中），可以极大的拓展核酸扩增检测的应用领域，方便更多仪器有限的实验室或检测中心来应用这一灵敏度很高的技术。

2、简化操作，从核酸提取，扩增到检测，每一步都尽可能降低对仪器的依赖，这样可以降低操作难度，方便非专业人员的操作。

3、快速操作，我们整合了5分钟核酸提取技术，30分钟核酸扩增技术，以及5分钟扩增产物检测技术。在实验参数优化后，能在40分钟完成核酸扩增检测。

基于常温核酸扩增技术，配套Click i核酸荧光检测仪和快速核酸释放试剂，将核酸检测带入精确、快速、智能的新时代。

Click i 核酸荧光检测仪
30分钟、42°C

Click i 核酸荧光检测仪将核酸检测带入精确、快速、智能的新时代。Click i 核酸荧光检测仪是集快速核酸扩增、实时荧光检测、智能数据处理和结果自动判读于一体的新型核酸检测设备。仪器工作原理基于自主研发的常温核酸扩增技术（Enzymes Mediated Amplification，EMA），降低了经典PCR技术对反应温度条件的限制，在较低温度下完成核酸扩增并采集荧光信号，实时监测、快速判读结果，稳定性强、精密度高；内置人性化操作系统，同时采用先进的数学模型进行数据处理和图形绘制，可自动判读结果；简单易懂的触屏操作界面，让舒适体验和专业技术融贯一体。

平台优势

技术参数

检测结果

快速核酸释放试剂

即将上市项目